neb内切酶 neb连接酶 neb聚合酶 m2200l quick ligation kit 150 rxns-欧洲杯投注官网

快速末端平齐化™ 和快速连接试剂盒
#e0542s        20 次反应            ?1,769
#e0542l        100 次反应          ?7,059

■  5 分钟快速连接粘性末端或平末端
■  室温下即可进行连接反应
■  t/a 克隆
■  dsdna 切刻修复

本试剂盒在室温（25℃）反应 5 分钟，即可完成 dna 粘性末端或平齐末端的连接反应。

– 快速 t4 dna 连接酶（重组酶）
– 2x 快速连接反应缓冲液

132 mm tris-hcl，20 mm mgcl₂，2 mm dtt，2 mm atp，15% 聚乙二醇（peg 6000），ph 7.6 @ 
25℃。

该试剂盒经过严格的质量控制检测，以确保酶的高纯度和高效率。

用快速连接试剂盒能使大多数连接反应在 25℃ 条件下 5 分钟甚至更短时间内达到反应终点，增加反应时间反应效率不会增强。事实上，连接 1 小时后转化效率便会降低，如果 25℃ 反应过通宵，则转化效率会下降到 75%。

电转化可以使转化效率提高几个数量级。在用快速连接反应产物做电转化前，一定要降低 peg 浓度。推荐使用柱离心式 dna 纯化方法，或选择电转连接酶（neb #m0369）。

快速连接进程曲线：litmus 28i 载体经 ecorv 切割（平齐末端）或 hindⅲ切割（粘性末端）后，用小牛肠碱性磷酸酶（cip）处理，胶回收纯化。插入片段来自 φx174 dna 的 haeⅲ 消化产物（平齐末端）或 λdna 的 hindⅲ 消化产物（粘性末端），插入片段和载体以 3:1 的比例，使用快速连接试剂盒进行连接。连接产物转化入化学方法制备的大肠杆菌感受态细胞，在 lb-amp 平板上 37℃ 过通宵培养。